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【實驗技巧】臺盼藍染色

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【實驗技巧】臺盼藍染色

2024-02-21昀冠科學商城新聞編輯

?臺盼藍

是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性,檢測細胞是否存活。活細胞不會被染成藍色,而死細胞會被染成淡藍色。

機理

正常的活細胞,胞膜結構完整,能夠排斥臺盼藍,使之不能夠進入胞內;而喪失活性或細胞膜不完整的細胞,胞膜的通透性增加,可被臺盼藍染成藍色。通常認為細胞膜完整性喪失,即可認為細胞已經死亡,這與中性紅作用相反。因此,借助臺盼藍染色可以非常簡便、快速地區分活細胞和死細胞。臺盼藍是組織和細胞培養中最常用的死細胞鑒定染色方法之一。


操作方法

1. 將待染色細胞稀釋至所需濃度(方法及濃度范圍與細胞計數相同);

2. 細胞懸液加新鮮配制的臺盼藍染液,室溫下染 3—5 min;

3. 染色過的細胞材料,取一滴細胞懸液置玻片上,加蓋玻片后放高倍鏡下觀察;

4. 死亡的細胞著淺藍色并膨大,無光澤。活細胞不著色并保持正常形態,有光澤;

5. 計數活細胞和死細胞數目;

6. 統計未染色細胞。可按公式計算出細胞活率。

(細胞活率 = 未染色的細胞數/觀察的細胞總數×100%)

注意事項

1. 此方法可以用于胞質胞核分離實驗中,檢測細胞是否充分裂解。

2. 臺盼藍染色時間不能太長,否則活細胞也會逐漸積累染料而染上顏色,使監測結果偏低。

3. 另可結合細胞計數方法,同時進行細胞計數和活力檢測。

4. 臺盼藍有潛在致癌危險,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


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